Требования к тестированию спор в автоклаве: комплексное руководство для учреждений здравоохранения и лабораторных условий

Объем и цель тестирования спор в автоклаве

Тестирование спор в автоклаве (тестирование биологических индикаторов) подтверждает, что циклы паровой стерилизации могут уничтожать высокоустойчивые споры — обычно Geobacillus stearothermophilus — в реальных условиях эксплуатации. В медицинских и лабораторных условиях тесты на споры дополняют физические мониторы и химические индикаторы для подтверждения уровней обеспечения стерильности (SAL) и соответствия нормативным требованиям и требованиям аккредитации.

В этом руководстве основное внимание уделяется практическим, реализуемым требованиям: как часто проводить тестирование, какие индикаторы использовать, проверенные рабочие процессы, критерии приемки, документация и устранение неполадок в случае возникновения сбоев.

Нормативно-правовая база и стандарты

Требования варьируются в зависимости от сектора и юрисдикции, но общие ориентиры включают ISO 11138 (биологические индикаторы), ISO 17665 (проверка стерилизации влажным жаром), AAMI ST79 (стерилизация паром в здравоохранении), рекомендации CDC/HICPAC, ожидания CMS и Объединенной комиссии для медицинских учреждений, а также практики GLP/GMP для исследовательских и биофармацевтических лабораторий. Предприятиям следует привести внутренние СОПы в соответствие с этими рамками и местными нормами.

• Здравоохранение: следуйте стандарту AAMI ST79 и применимым требованиям аккредитации; проводить регулярное BI-тестирование и документировать корректирующие действия.
• Клинические лаборатории и исследования: соответствие ожиданиям ISO/GMP/GLP и институциональной политике биобезопасности; подчеркивайте валидацию и рутинную проверку.
• Фармацевтические компании и производители устройств: интегрируйте использование BI с аттестацией производительности (PQ) и постоянной реквалификацией в соответствии с правилами системы качества.

Минимальная частота тестирования и триггеры

Частота должна обеспечивать постоянную гарантию стерильности без нарушения операций. Следующий практический график уравновешивает риски и ожидания регулирующих органов.

• Плановое BI-тестирование: не реже одного раза в неделю для каждого парового стерилизатора в здравоохранении; Учреждения повышенного риска могут работать ежедневно.
• После технического обслуживания или ремонта: перед возвратом стерилизатора в эксплуатацию выполните BI-тест.
• После перемещения, установки или крупных изменений в инженерных сетях: проведите квалификацию установки (IQ), эксплуатационную квалификацию (OQ) и PQ на основе BI.
• Изменения цикла. Любое изменение конфигурации загрузки, параметров цикла или упаковки требует повторной проверки BI.
• Триггеры, основанные на событиях: BI-тестирование после отказа любого химического индикатора, сомнительного теста Боуи-Дика, аномальных физических распечаток или влажной нагрузки.

Выбор биологических индикаторов

Выбирайте BI, предназначенные для стерилизации влажным жаром, с отслеживаемой сертификацией партии и соответствующими характеристиками устойчивости. Цель состоит в том, чтобы бросить вызов циклу с помощью известной стандартизированной микробной нагрузки.

• Организм: споры Geobacillus stearothermophilus для паровых циклов (обычно 121–134°C).
• Формат: Автономные БИ (ампулы/флаконы с питательной средой) для практического клинического использования; полосовые BI для лабораторных проверочных исследований.
• Сопротивление: проверьте значение D при соответствующих температурах (например, D121°C) и значение z из сертификата производителя.
• Отслеживание партии: Сохраняйте сертификаты анализа (COA) с указанием количества, D-значений, срока действия и условий хранения.
• Время считывания: BI быстрого чтения (1–3 часа) поддерживают более быстрое высвобождение; стандартные инкубации (24–48 часов) остаются приемлемыми для регулярного мониторинга.

Размещение и конфигурация нагрузки

Размещение BI должно бросать вызов самым трудным для стерилизации местам. Плохое размещение может маскировать недостатки цикла, что приводит к ложной уверенности.

• Области наихудшего случая: глубоко внутри наборов инструментов, плотных текстильных упаковок, обернутых контейнеров или просветов; центральная масса груза, а не края.
• Репрезентативные нагрузки: тестируйте самые тяжелые, плотные и сложные конфигурации, которые регулярно обрабатываются.
• Несколько BI: используйте хотя бы один BI; рассмотрите возможность использования дополнительных устройств для больших камер или смешанных загрузок для отбора проб из нескольких холодных точек.
• Интегрируйте химические индикаторы. Соедините химические интеграторы класса 5 с BI, чтобы обеспечить немедленную визуальную обратную связь во время инкубации результатов культивирования.

Валидированный рабочий процесс тестирования

Проверки перед циклом

Проверьте качество воды, чистоту камеры, целостность упаковки и прохождение теста Боуи-Дика (для предвакуумных стерилизаторов). Убедитесь, что загрузка подходит для стерилизации паром, а инструменты очищены и высушены.

Подготовка и размещение BI

Запишите лот BI и срок его действия. Разместите BI внутри самой сложной части груза (например, внутри обернутого лотка, в центре текстильной упаковки или внутри имитатора просвета). Включите контрольный BI, который не стерилизовался для сравнения инкубации.

Запустить цикл с правильными параметрами

Используйте утвержденный цикл (например, 132–134 °C в течение 4 минут для упакованных инструментов или 121 °C в течение 30 минут для определенных загрузок) в соответствии с инструкциями производителя и СОП предприятия. Убедитесь, что сушка завершена, чтобы избежать намокания пакетов.

Инкубация и считывание

Инкубируйте обработанный BI и необработанный контроль на BI IFU. Для быстросчитываемых BI следуйте указанным протоколам флуоресценции или изменения цвета. Отрицательный результат роста в обработанном BI наряду с ростом положительного контроля указывает на прохождение теста.

Документация и выпуск

Записывайте параметры цикла (время, температура, давление), детали BI, размещение и результаты. При стерильной обработке в здравоохранении не выпускайте критические нагрузки для использования пациентами до тех пор, пока не будут подтверждены приемлемые результаты BI, за исключением случаев, когда допускается документированное исключение с управлением рисками.

Критерии приемки и интерпретация

Приемлемый результат требует, чтобы обработанный BI не показал роста, в то время как необработанный контрольный показатель показывает рост. Химические индикаторы должны достигать конечной точки, а физические мониторы должны отражать правильные параметры цикла.

• Пройден: обработанный BI отрицательный, контрольный BI положительный; физические записи в пределах допуска; химические показатели прошли.
• Неудачно: любой обработанный BI показывает рост или элемент управления не может расти; расцените это как неудачу стерилизации и инициируйте корректирующие действия.
• Двусмысленно: противоречивые показания (например, пограничная флуоресценция); повторите действия со свежими BI и удерживайте затронутые нагрузки до тех пор, пока они не будут устранены.

Корректирующие действия при сбоях BI

Отказ BI сигнализирует о потенциальной недостаточной летальности. Ответьте структурированным расследованием, локализацией и повторным тестированием, прежде чем возобновить обычные операции.

• Карантин: удержание и отзыв всех загрузок с момента последней известной передачи BI; предотвратить использование пациентами или развертывание лаборатории.
• Проверка элементов управления: подтвердите контроль роста BI и исключите ошибки обработки BI или индикаторы с истекшим сроком действия.
• Анализ первопричин: просмотрите распечатки цикла, качество пара, утечки воздуха, методы загрузки, упаковку и обслуживание камеры.
• Повторная квалификация: выполнить метод Боуи-Дика (если применимо), повторить BI-тестирование с нагрузками наихудшего случая и проверить параметры перед выпуском.
• Документация: Запишите расследование, корректирующие действия и результаты аудита и постоянного улучшения.

Интеграция BI с другими инструментами мониторинга

Тестирование спор является одним из столпов мультимодальной программы обеспечения безопасности. Комбинирование индикаторов усиливает обнаружение и предотвращает ложноотрицательные результаты.

• Физические мониторы: записи температуры, давления и времени воздействия из диаграммы/распечатки стерилизатора или регистратора данных.
• Химические индикаторы: внешние (воздействие упаковки) и внутренние интеграторы класса 4–5 для подтверждения параметров упаковки и уровня нагрузки.
• Тест Боуи-Дика: Ежедневное удаление воздуха и проверка проникновения пара в стерилизаторы с предварительным вакуумированием.
• Устройства для проверки процесса (PCD): стандартизированные сборки, которые имитируют условия наихудшего случая для последовательного размещения BI.

Документация, отслеживаемость и готовность к аудиту

Надежная документация способствует соблюдению требований и быстрому расследованию. Электронные системы упрощают отслеживание нагрузок, индикаторов и событий технического обслуживания.

• Ведение учета: параметры цикла, партия BI/срок годности, размещение, идентификатор инкубатора, время считывания и окончательная интерпретация.
• Связь: свяжите результаты BI с конкретными загрузками, лотками, случаями пациентов (здравоохранение) или экспериментальными партиями (лаборатории).
• Хранение: ведите учет в соответствии с политикой и нормативными сроками; архивировать сертификаты подлинности и журналы обслуживания.
• Обзор: периодические внутренние аудиты и определение тенденций результатов BI для выявления повторяющихся проблем и улучшения СОП.

Требования к компетентности и обучению персонала

Компетентный персонал гарантирует надежные результаты. Обучение должно сочетать теорию с практической практикой и оценкой компетентности.

• Ориентация: Принципы паровой стерилизации, наука о бизнес-аналитике и ссылки на стандарты (AAMI ST79, ISO 11138).
• Техника: правильная обработка, размещение, инкубация и интерпретация BI, включая использование элементов управления.
• Устранение неполадок: выявление аномалий цикла, влажных пакетов, утечек воздуха и передовой опыт документирования.
• Компетенция: первоначальные и периодические оценки с наблюдением за прогонами BI и записью проверок.

Вопросы окружающей среды и оборудования

Производительность стерилизатора зависит от конструкции камеры, качества пара и стабильности оборудования. Факторы окружающей среды могут напрямую влиять на результаты BI.

• Качество пара: надлежащая фракция сухости и пределы неконденсируемого газа; избегайте перегрева и обеспечьте достаточное удаление воздуха.
• Погрузка и упаковка: Избегайте перегрузки; используйте проверенную обертку, жесткие контейнеры и оставляйте достаточное пространство для проникновения пара.
• Техническое обслуживание: регулярные проверки прокладок, работоспособности вакуумной системы, сливных фильтров и калибровка датчиков.
• Коммунальные услуги: стабильное водоснабжение, канализация и сжатый воздух (если применимо) для предотвращения колебаний цикла.

Краткий справочник: краткий обзор требований

В таблице ниже кратко изложены основные требования к занятым командам в здравоохранении и лабораториях.

Практические советы для работников здравоохранения и лабораторий

Последовательность и внимание к деталям обеспечивают надежные результаты. Следующие методы уменьшают изменчивость и разрешение скорости при возникновении аномалий.

• Стандартизировать карты размещения BI для распространенных грузов; включать фотографии в СОП.
• Трендируйте результаты BI по стерилизаторам, типам цикла и конфигурации загрузки для выявления закономерностей.
• Используйте быстросчитываемые BI, чтобы минимизировать время удержания важных для пациента инструментов, сохраняя при этом строгость.
• Проводить периодические испытания камеры с использованием PCD для проверки эффективности удаления воздуха.
• Согласуйте графики обслуживания с периодами BI-тестирования, чтобы ускорить проверку после обслуживания.

Ключевые выводы

Тестирование спор является окончательным доказательством эффективности стерилизации паром. Создайте график, основанный на рисках, выберите отслеживаемые индикаторы, разместите BI в местах наихудшего случая, тщательно документируйте и решительно действуйте в случае сбоев. Комплексный мониторинг и обученный персонал обеспечивают надежную гарантию стерильности как в медицинских, так и в лабораторных условиях.