Проверка эффективности стерилизации автоклавов

Одним из наиболее важных инструментов в лаборатории микробиологии является стерилизатор, причем наиболее часто используется автоклав (паровое стерилизатор высокого давления). Согласно GB 4789.1-2016, лабораторное оборудование следует регулярно проверять и/или откалибровать (с инспекционными мегами), поддерживать и обслуживаться для обеспечения надлежащей производительности и эксплуатационной безопасности. Но подвергался ли ваш автоклав в такие проверки? И если вы хотите выполнить проверку, как вы это сделать? Сегодня мы суммируем ключевые методы проверки эффективности стерилизации автоклавов.

Проверка эффективности стерилизации автоклав, как правило, включает в себя такие методы, как химический индикатор, максимальный термометр, самодельная температурная трубка и биологический индикатор. Хотя эти методы имеют аналогичные принципы - в основном подтверждая, достигает ли стерилизатор необходимую температуру во время стерилизации - вы можете выбрать один или несколько, основываясь на конкретных условиях вашей лаборатории.

1. Метод химического индикатора

Принцип: химические показатели подвергаются изменению цвета или формы в определенных условиях температуры и времени. Это изменение используется для определения того, были ли выполнены параметры стерилизации.

Обычно используемым элементом в лабораториях является 3 -метровая индикаторная лента автоклаве, которая изменяет цвет после стерилизации. Лента изготовлена ​​из термочувствительных химикатов, разработчиков цвета и материалов для краски, напечатанных на полосовой узоре на клейкой ленте. Он применяется непосредственно к внешней стороне пакета стерилизации, с минимальной длиной 5 см. Слегка нажмите кнопку, чтобы обеспечить хорошую адгезию и герметику. После воздействия на 121 ° C в течение 20 минут или 130 ° C в течение 4 минут диагональные белые полосы на ленте должны стать полностью черными. Если изменение цвета неровно или неполное, пакет считается неправильно стерилизованным.

2. Метод максимального термометра

Принцип: этот метод использует ртутный термометр, который не возвращается к более низкой температуре после нагрева, аналогично традиционному медицинскому термометру. Это указывает на максимальную температуру, достигнутую во время стерилизации.

Для проверки поместите термометр ртуть в воду, заполненную водой колбу Erlenmeyer. Во время стерилизации поместите колбу на верхних и нижних участках автоклава. После процесса проверьте, соответствует ли показания термометра необходимой температуре. Этот метод может только проверить температуру и не может подтвердить, было ли выполнено требование времени стерилизации, поэтому он представляет минимальный стандарт для проверки автоклав.

3. Метод самостоятельной температурной трубки

Принцип: этот метод использует определенные химические вещества, которые платят и перекристаллизуются при определенных температурах, с отличительными кристаллическими формами после охлаждения. Эти химические вещества запечатаны в небольших стеклянных трубках и помещают внутри автоклав. После стерилизации форма кристалла исследуется, чтобы определить, была ли правильная температура.

Обычно используется бензоевая кислота, с температурой плавления 121–123 ° C, которая соответствует стандартной температуре стерилизации автоклава. Сплошная бензойная кислота герметизируется в небольших стеклянных трубках и помещается в автоклав. После стерилизации наблюдается состояние бензойной кислоты, подтверждает, была ли достигнута целевая температура. Как и метод максимального термометра, этот подход только проверяет температуру, а не продолжительность стерилизации.

4. Метод биологического индикатора

Принцип: в этом методе используются непатогенные споры Geobacillus stearothermophilus в качестве индикаторных организмов для оценки эффективности тепловой стерилизации. Эти споры очень устойчивы к теплостойкости, с сопротивлением, аналогичной резистентности патогенных ботулинийных споров, что делает их подходящими показателями для проверки эффективности стерилизации.

Биологические индикаторы доступны в трех формах: подвески спор, спортивные полосы и интегрированные трубки споры и среды. Они обычно расположены в пяти местах в контейнере стерилизации: передней, средней и задней части нижнего слоя, а также центральные точки верхнего и среднего слоев. После стерилизации индикаторы инокулируют в бромокрол фиолетовой глюкозо-пептоновой воду и инкубируют при 55–60 ° C в течение 2–7 дней. Если среда остается чистой и неизменной по цвету, споры были убиты, что указывает на хорошую стерилизацию. Если среда становится желтой и мутной, споры выжили, предполагая плохую эффективность стерилизации. Как приостановки споры, так и полосы спор следуют одному и тому же процессу проверки.

Коммерческие биологические индикаторные трубки также обычно используются в лабораториях. Они содержат споры Geobacillus Stearothermophilus и герметичную стеклянную ампулу со средой роста. Пробирки расположены по всему контейнеру стерилизации. После автоклавирования стеклянная ампула измельчается для высвобождения среды, а трубка инкубируется при 56 ° C, а также положительный контроль. Если стерилизация неадекватна, выжившие споры будут расти и превратят бульон желтым. Если стерилизация эффективна, споры инактивированы, а бульон остается фиолетовым.

Частота проверки

В настоящее время нет строгого национального стандарта относительно частоты проверки эффективности автоклав. Ожидается, что лаборатории установят свои собственные графики проверки и строго придерживаться их. Учитывая как простоту использования, так и надежность результатов, мы рекомендуем использовать индикаторную ленту в сочетании с биологическими индикаторными трубками, поскольку они предлагают простую работу и всестороннюю проверку эффективности стерилизации.

Примечания по стерилизации (не требуется для некоторых импортированных полностью автоматических автоклавов)
При использовании парового стерилизатора высокого давления крайне важно изгнать весь холодный воздух внутри камеры при выпуске пар. Только после того, как весь холодный воздух будет удален, если выпускной клапан будет закрыт. Если какой -либо воздух останется, манометр может указывать на правильное давление, но фактическая температура внутри камеры не превзойдет. Чем больше воздуха сохраняется, тем больше расхождение между давлением и температурой, потенциально приводит к неполной стерилизации. (Это часто наблюдается во время стерилизации ферментационных сред, где пузырьки воздуха остаются в небольших направляющих трубках - более тщательно пробуждая холодный воздух.)