Как автоклавировать жидкости: пошаговое руководство по безопасной стерилизации

Автоклавирование жидкостей – это не просто установка бутылок в камеру и нажатие кнопки «Старт». Жидкости ведут себя совсем иначе, чем твердые инструменты, под воздействием высокой температуры и давления — они расширяются, кипят и могут разрушить контейнеры при неправильном обращении. Следуйте приведенным ниже инструкциям, чтобы каждый раз безопасно и эффективно стерилизовать жидкие среды, буферы и растворы.

Почему для жидкостей нужен специальный автоклавный цикл

Большинство автоклавов предлагают как минимум три типа цикла: гравитационное перемещение, предварительный вакуум (пористая загрузка) и жидкостный. Всегда выбирайте жидкостный цикл для жидкостных загрузок. В конце цикла гравитации и предварительного вакуума давление в выхлопной камере слишком быстрое, что приводит к резкому выкипанию перегретых жидкостей, их разливу и потенциальному растрескиванию или разрушению контейнеров.

В жидкостном цикле используется медленная фаза выпуска — давление сбрасывается постепенно, так что температура внутри контейнеров безопасно падает до того, как камера откроется. Некоторые современные агрегаты также подают в камеру сжатый отфильтрованный воздух во время охлаждения, чтобы поддерживать противодавление и предотвращать выкипание. Более широкий обзор того, как работают различные циклы стерилизации, см. в нашей статье. руководство по паровому стерилизатору под давлением .

Шаг за шагом: подготовка и погрузка жидких грузов

1. Выберите подходящий контейнер. Используйте только боросиликатное стекло (например, Pyrex или Kimax), полипропилен или контейнеры, специально предназначенные для автоклавирования. Стандартные стеклянные или полиэтиленовые контейнеры треснут или расплавятся. Никогда не используйте запечатанные контейнеры — повышение давления внутри запечатанного сосуда может привести к его взрыву.

2. Заполните до нужного уровня. Не заполняйте контейнер более чем на две трети. Во время стерилизации жидкости расширяются и пенятся, а полная бутылка закипает, загрязняя камеру и тратя среду. Для сред на основе агара заполняйте не более чем наполовину, чтобы обеспечить дополнительное свободное пространство для вспенивания.

3. Ослабьте все колпачки. Крышки должны быть достаточно свободными, чтобы обеспечить выравнивание давления пара, но не настолько свободными, чтобы они могли упасть. Закрепите ослабленные крышки автоклавной лентой. Для контейнеров без крышек закройте отверстие алюминиевой фольгой, закрепив ее скотчем.

4. Поместите контейнеры во дополнительный лоток. Всегда загружайте контейнеры с жидкостью в лоток из полипропилена или нержавеющей стали с прочными стенками и прочным дном. Добавьте в поддон примерно 1–2 см воды, чтобы обеспечить равномерный нагрев и собрать пролитую воду. Между бутылками оставляйте расстояние не менее 2–3 см, чтобы пар мог свободно циркулировать. Используйте правильный тип воды для вашего автоклава — обычно рекомендуется дистиллированная вода. Рекомендации по качеству воды можно найти в нашей статье Типы воды в автоклаве и уход за ней .

Настройки цикла: температура, давление и время

Стандартные утвержденные параметры жидкостной стерилизации: 121°C при 15 фунтах на квадратный дюйм (103 кПа) . Такого сочетания температуры и давления достаточно, чтобы уничтожить вегетативные бактерии, грибы и большинство спор. На некоторых предприятиях для сокращения времени цикла используется температура 134°C, но это увеличивает риск ухудшения качества термочувствительных сред.

Время воздействия не фиксировано — оно напрямую зависит от объема жидкости в контейнере, а не от общего объема загрузки:

Если груз содержит контейнеры разных размеров, всегда рассчитывайте время цикла на основе самого большого контейнера. Вязкие жидкости и жидкости в пластиковых контейнерах также требуют дополнительного времени, поскольку пластик изолирует тепло лучше, чем стекло. Подробную информацию о рабочих температурах см. в нашем руководстве по температура пара для стерилизации .

Безопасное охлаждение и разгрузка

Именно на этом этапе происходит большинство несчастных случаев. Даже после завершения цикла жидкость внутри контейнеров может все еще быть перегретой — то есть она имеет температуру выше 100°C, но еще не закипела, поскольку остается под давлением. Перемешивание или быстрый сброс давления перегретой жидкости может вызвать внезапное сильное кипение.

Всегда соблюдайте следующие правила:

• Подождите, пока манометр достигнет нуля. прежде чем попытаться открыть дверь. Большинство автоклавов имеют блокировку, которая предотвращает открытие дверцы при температуре выше 80°C, но не полагайтесь только на это.
• Сначала приоткройте дверь на 1–2 см. Стойте сбоку, а не прямо перед собой. Дайте остаточному пару выйти в течение как минимум 10 минут, прежде чем полностью открывать и выгружать.
• Носите полный комплект средств индивидуальной защиты: термостойкие перчатки, резиновый фартук и защитная маска (а не только защитные очки) при разгрузке жидкостей.
• Не перемешивайте и не перемещайте контейнеры, пока они не остынут. Дайте жидкостям остыть на месте в течение как минимум 20–30 минут или дольше, если объем превышает 1 л. Четко промаркируйте это место, чтобы предупредить окружающих, что груз горячий.
• Не закручивайте крышки до полного остывания жидкости. Запечатывание горячего контейнера задерживает остаточный пар, который создает давление и может привести к тому, что бутылка треснет или лопнет.

Любые разливы внутри камеры следует удалять сразу после того, как все остынет. Остатки среды, оставленные в камере или сливе, могут карамелизироваться, засорить сливной фильтр и поставить под угрозу будущие циклы.